①培养室应清扫干净并严格消毒。

②菌种瓶应先竖放，当菌丝萌发定植后，改为横卧叠放。横放的菌种瓶可经常转动，使瓶内水分分布均匀。

③适时检查：有杂菌要及时清理；菌种未萌发，应补接菌种。当菌丝长满料面并深入料内1～2cm后，可改为5～7天检查一次。

④注意保持和调整培养室的温度：起初应保持菌丝生长的适宜温度，使菌丝能尽快生长、吃料，当菌丝快长满瓶时，要降低培养温度2～3℃，使菌丝健壮、增强生活力。

⑤注意调节空气、光照和湿度：要保持室内空气新鲜（经常通风换气），避免强光照射（应遮光），避免空气湿度过大（可减少污染）。

⑥做好防虫、防鼠、防杂菌工作。

⑦菌种长满后7～10天应及时转接。

（1）接种空间一定要彻底的消毒灭菌；

（2）菌种所暴露或通过的空间必须是无菌区；

（3）菌种管口、瓶口部分、必须用酒精灯火焰封闭；

（4）各种接种工具和菌种接触前都应该经火焰燃烧灭菌冷却后再接种；

（5）棉塞塞入管口或瓶口部分，拔出后不要与未经灭菌的物体接触；

（6）每次接种时间不宜过长；

（7）操作人员要戴口罩，换消毒工作服，双手用75%酒精棉球消毒；

（8）操作过程要动作迅速无误。

（1）选择发酵场地：以日光温室或半地下式太阳能温室为宜。保证发酵场地有较高的温度。

（2）培养料中的水分：最好分两次补足，有利于发酵。此种灭菌方法适用于平菇、金顶侧耳、白灵菇的栽培和蘑菇的后发酵。

伞菌是包括通常称其子实体为蘑菇（mushroom）的一类担子菌，由菌盖（pileus，cap）、菌柄（stipe，stem，stalk）、菌环和菌托等部分构成。

1.菌盖：菌盖是担子果最明显的部分，形状多种多样，菌盖边缘的形状有全缘或开裂，有的边缘内折或外翻，有的边缘平滑，有的边缘平滑具条纹，菌盖表面的皮层或角质层的菌丝体内常含有不同的颜色，使菌盖呈现白、黄、灰、红、紫、绿等不同的色泽，菌盖表面干燥、湿润或粘稠，平滑或粗糙。有些种类的菌盖表面具鳞片、纤毛或鳞片。

2.菌柄菌柄在菌盖下面，是联结和支撑菌盖的“支柱”，有中生、偏生或侧生之分，与菌盖不易分离或极易分离。质地有肉质、蜡质、纤维质等。菌柄颜色多种，形状也各不同，如圆柱状、棒状、纺锤状、杆状、粗筒形、圆头形、假根形等。

3.菌环和菌托菌环是内菌膜遗留在菌柄上的环状物，常在菌柄的上部，有各种形状，单层、双层或齿轮形。菌环的有无是鉴定种属的重要依据。菌托是菌柄在伸长时，外菌膜破裂形成的，菌托的形状有苞状（saccatE.、杯环状（marginatE.、鳞片状（friablE.、粉状（powdery）、环带状等。菌环、菌托的有无是伞菌分类鉴定中重要的特征。

（1）种龄：转管次数不超过第5代的原种

（2）有效期：满瓶后三个月内有效草菇一个月内有效

（3）菌种的外观：菌丝生长健壮色泽洁白无杂菌虫害杂色出现银耳菌种除白色的银耳菌丝外还应有烟丝菌丝种瓶内无黄色水汁（菌丝老化代谢产物出现）总要求：纯、正、状、润、香。

菌褶上部的菌盖组织菌丝分化程度低、分化迟，产孢子前细胞质浓度高，细胞大，形成孢子所需要的养分和生长促进物质在这里大量聚积，然后再输送到孢子中去，这一部分组织最具活力。因此组织分离繁育菌种应用这一部分组织进行分离为好。

应7月下旬制母种，8月初制原种，9月初制栽培种。

压蒸气灭菌亦称流通蒸气灭菌，温度一般为100℃或略高。此法优点是设备简单，投资较少，因温度不很高，培养料中养分不易破坏，可大量处理需要灭菌的物品。缺点是灭菌时间长，达100℃后，须持续8个小时以上，方可保证灭菌效果，燃料耗费多。

常压蒸气灭菌亦称流通蒸气灭菌，温度一般为100℃或略高。此法优点是设备简单，投资较少，因温度不很高，培养料中养分不易破坏，可大量处理需要灭菌的物品。缺点是灭菌时间长，达100℃后，须持续8个小时以上，方可保证灭菌效果，燃料耗费多。

（1）手、母种管、接种工具酒精消毒，点燃酒精灯。本题解析：试题答案（1）手、母种管、接种工具酒精消毒，点燃酒精灯。

（2）左手持母种管、右手持接种镐并灼烧（竖直、横拉）。

（3）拔掉棉塞，灼烧管口，并以火焰封住管口。

（4）将接种铲伸进母种管内，待冷凉，弃除前端1cm处的培养基，接种镐一经灭菌后不许接触未经灭菌的物体。

（5）将母种菌种切成5段，迅速移进原种瓶口，菌种不能掉外面（同时另一人将瓶口打开，并以火焰飞封口）。

（6）要以原种瓶口迎母种管口，不能反向。